Tyrimo protokole paprastai nurodomi du analizės metodai kartu - HPLC ir LC-MS - nes jie atsako į skirtingus klausimus. Pažymą skaityti lengviau žinant, kuris atsakymas iš kurio metodo.
HPLC - kiek
Efektyvioji skysčių chromatografija atskiria mėginio komponentus jiems einant per kolonėlę, o detektorius (dažniausiai UV) kiekvieną matuoja kaip smailę. Pagrindinės smailės plotas prieš likusią dalį duoda grynumo procentą. HPLC yra kiekio ir atskyrimo klausimas: kiek yra pagrindinio komponento ir kiek yra kažko kito.
LC-MS - kas tai
Skysčių chromatografija-masių spektrometrija prideda masės detektorių. Po atskyrimo masių spektrometras išmatuoja molekulės masę, kuri naudojama tapatybei patvirtinti - ar junginys iš tikrųjų tas, kurio tikimasi. HPLC gali rodyti švarią, vieną smailę, kuri vis tiek yra ne ta molekulė; LC-MS ir užpildo tą spragą.
Kodėl abu
Grynumas be tapatybės - skaičius be atsparos taško; tapatybė be grynumo nieko nesako apie nepageidaujamos medžiagos kiekį. Kartu HPLC ir LC-MS nurodo ir kas yra junginys, ir kiek jo yra partijoje - todėl rimtas tyrimo protokolas pateikia abu.